पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है?

पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन

जेल वैद्युतकणसंचलन जैविक विषयों की प्रयोगशालाओं में एक मौलिक तकनीक है, जो डीएनए, आरएनए और प्रोटीन जैसे मैक्रोमोलेक्यूल्स को अलग करने की अनुमति देती है।विभिन्न पृथक्करण मीडिया और तंत्र इन अणुओं के उपसमूहों को उनकी भौतिक विशेषताओं का उपयोग करके अधिक प्रभावी ढंग से अलग करने की अनुमति देते हैं।विशेष रूप से प्रोटीन के लिए, पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (पेज) अक्सर पसंद की तकनीक होती है।

पेज एक ऐसी तकनीक है जो प्रोटीन जैसे मैक्रोमोलेक्यूल्स को उनकी इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता के आधार पर अलग करती है, यानी एनालिटिक्स की विपरीत चार्ज के इलेक्ट्रोड की ओर बढ़ने की क्षमता।पृष्ठ में, यह अणु के आवेश, आकार (आणविक भार) और आकार द्वारा निर्धारित किया जाता है।एनालिटिक्स पॉलीएक्रिलामाइड जेल में बने छिद्रों के माध्यम से चलते हैं।डीएनए और आरएनए के विपरीत, प्रोटीन शामिल किए गए अमीनो एसिड के अनुसार अलग-अलग होते हैं, जो उनके चलने के तरीके को प्रभावित कर सकते हैं।अमीनो एसिड स्ट्रिंग्स द्वितीयक संरचनाएं भी बना सकती हैं जो उनके स्पष्ट आकार को प्रभावित करती हैं और परिणामस्वरूप वे छिद्रों के माध्यम से कैसे आगे बढ़ने में सक्षम होती हैं।इसलिए कभी-कभी यह वांछनीय हो सकता है कि यदि आकार के अधिक सटीक अनुमान की आवश्यकता हो तो प्रोटीन को रैखिक बनाने के लिए इलेक्ट्रोफोरेसिस से पहले उन्हें विकृत किया जाए।

एसडीएस पेज

सोडियम-डोडेसिल सल्फेट पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस एक तकनीक है जिसका उपयोग 5 से 250 केडीए द्रव्यमान के प्रोटीन अणुओं को अलग करने के लिए किया जाता है।प्रोटीन को केवल उनके आणविक भार के आधार पर अलग किया जाता है।सोडियम डोडेसिल सल्फेट, एक आयनिक सर्फैक्टेंट, जैल की तैयारी में जोड़ा जाता है जो प्रोटीन नमूनों के आंतरिक चार्ज को छुपाता है और उन्हें द्रव्यमान अनुपात के समान चार्ज देता है।सरल शब्दों में, यह प्रोटीन को विकृत करता है और उन्हें नकारात्मक चार्ज देता है।

मूल पृष्ठ

नेटिव पेज एक ऐसी तकनीक है जो प्रोटीन को अलग करने के लिए गैर-विकृत जैल का उपयोग करती है।एसडीएस पेज के विपरीत, जैल की तैयारी में कोई डिनाट्यूरिंग एजेंट नहीं जोड़ा जाता है।परिणामस्वरूप, प्रोटीन का पृथक्करण प्रोटीन के आवेश और आकार के आधार पर होता है।इस तकनीक में, प्रोटीन की संरचना, तह और अमीनो एसिड श्रृंखलाएं ऐसे कारक हैं जिन पर पृथक्करण निर्भर करता है।इस प्रक्रिया में प्रोटीन क्षतिग्रस्त नहीं होते हैं, और पृथक्करण के पूरा होने के बाद उन्हें पुनः प्राप्त किया जा सकता है।

पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (पेज) कैसे काम करता है?

पेज का मूल सिद्धांत विद्युत प्रवाह का उपयोग करके पॉलीएक्रिलामाइड जेल के छिद्रों के माध्यम से एनालिटिक्स को अलग करना है।इसे प्राप्त करने के लिए, एक एक्रिलामाइड-बिसैक्रिलामाइड मिश्रण को अमोनियम परसल्फेट (एपीएस) के अतिरिक्त द्वारा पॉलिमराइज़ किया जाता है (पॉलीएक्रिलामाइड)।प्रतिक्रिया, जो टेट्रामिथाइलएथिलीनडायमाइन (टीईएमईडी) द्वारा उत्प्रेरित होती है, छिद्रों के साथ एक जाल जैसी संरचना बनाती है जिसके माध्यम से विश्लेषक आगे बढ़ सकते हैं (चित्रा 2)।जेल में शामिल कुल एक्रिलामाइड का प्रतिशत जितना अधिक होगा, छिद्र का आकार उतना ही छोटा होगा, इसलिए प्रोटीन भी उतना ही छोटा होगा जो इसमें से गुजर सकेगा।एक्रिलामाइड और बिसैक्रिलामाइड का अनुपात भी छिद्र के आकार को प्रभावित करेगा लेकिन इसे अक्सर स्थिर रखा जाता है।छोटे छिद्र आकार उस गति को भी कम कर देते हैं जिस पर छोटे प्रोटीन जेल के माध्यम से आगे बढ़ने में सक्षम होते हैं, उनके रिज़ॉल्यूशन में सुधार करते हैं और करंट लागू होने पर उन्हें तेजी से बफर में बहने से रोकते हैं।

पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन के लिए उपकरण

जेल वैद्युतकणसंचलन सेल (टैंक/चैंबर)
पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन (पेज) के लिए जेल टैंक एगरोज़ जेल टैंक से अलग है।एगरोज़ जेल टैंक क्षैतिज है, जबकि पेज टैंक ऊर्ध्वाधर है।ऊर्ध्वाधर वैद्युतकणसंचलन सेल (टैंक/चैंबर) द्वारा, एक पतली जेल (सामान्यतः 1.0 मिमी या 1.5 मिमी) को दो ग्लास प्लेटों के बीच डाला जाता है और लगाया जाता है ताकि जेल का निचला भाग एक कक्ष में बफर में डूबा रहे और शीर्ष बफर में डूबा रहे। दूसरे कक्ष में.जब करंट लगाया जाता है, तो बफर की एक छोटी मात्रा जेल के माध्यम से शीर्ष कक्ष से निचले कक्ष में स्थानांतरित हो जाती है।असेंबली के सीधी स्थिति में रहने की गारंटी के लिए मजबूत क्लैंप के साथ, उपकरण तेजी से जेल चलाने की सुविधा देता है और साथ ही ठंडा भी करता है जिसके परिणामस्वरूप अलग-अलग बैंड बनते हैं।

बीजिंग लियूई बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड (लियूई बायोटेक्नोलॉजी) कई आकार के पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (टैंक/चेंबर) बनाती है।मॉडल DYCZ-20C और DYCZ-20G डीएनए अनुक्रमण विश्लेषण के लिए ऊर्ध्वाधर वैद्युतकणसंचलन कोशिकाएं (टैंक/कक्ष) हैं।कुछ ऊर्ध्वाधर वैद्युतकणसंचलन कोशिकाएं (टैंक/कक्ष) ब्लॉटिंग सिस्टम के साथ संगत हैं, जैसे मॉडल DYCZ-24DN, DYCZ-25D और DYCZ-25E वेस्टर्न ब्लॉटिंग सिस्टम मॉडल DYCZ-40D, DYCZ-40G और DYCZ-40F के साथ संगत हैं। जिनका उपयोग प्रोटीन अणु को जेल से झिल्ली में स्थानांतरित करने के लिए किया जाता है।एसडीएस-पेज वैद्युतकणसंचलन के बाद, वेस्टर्न ब्लॉटिंग प्रोटीन मिश्रण में एक विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने की एक तकनीक है।आप प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार इन ब्लॉटिंग प्रणालियों को चुन सकते हैं।

वैद्युतकणसंचलन विद्युत आपूर्ति
जेल चलाने के लिए बिजली प्रदान करने के लिए, आपको इलेक्ट्रोफोरेसिस बिजली आपूर्ति की आवश्यकता होगी।लियूई बायोटेक्नोलॉजी में हम सभी अनुप्रयोगों के लिए इलेक्ट्रोफोरेसिस बिजली आपूर्ति की एक श्रृंखला प्रदान करते हैं।उच्च स्थिर वोल्टेज और करंट वाले मॉडल DYY-12 और DYY-12C उच्च वोल्टेज आवश्यकता वैद्युतकणसंचलन को पूरा कर सकते हैं।इसमें स्टैंड, टाइमिंग, वीएच और चरण-दर-चरण अनुप्रयोग का कार्य है।वे आईईएफ और डीएनए अनुक्रमण वैद्युतकणसंचलन अनुप्रयोग के लिए आदर्श हैं।सामान्य प्रोटीन और डीएनए वैद्युतकणसंचलन अनुप्रयोग के लिए, हमारे पास मॉडल DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, इत्यादि हैं, जो वैद्युतकणसंचलन कोशिकाओं (टैंक/कक्ष) के साथ गर्म बिक्री बिजली आपूर्ति भी हैं।इनका उपयोग मध्यम और निम्न वोल्टेज वैद्युतकणसंचलन अनुप्रयोगों के लिए किया जा सकता है, जैसे कि स्कूल प्रयोगशाला उपयोग, अस्पताल प्रयोगशाला इत्यादि के लिए।बिजली आपूर्ति के लिए अधिक मॉडल, कृपया हमारी वेबसाइट पर जाएँ।

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पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन क्या है के लिए संदर्भ
1. करेन स्टीवर्ड पीएचडी पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन, यह कैसे काम करता है, तकनीक वेरिएंट, और इसके अनुप्रयोग