एसीटेट सेल्युलोज झिल्ली पर वैद्युतकणसंचलन तैयारी और नमूना अनुप्रयोग

प्रीप्रोसेसिंग एसीटेट सेलूलोज़ झिल्ली

झिल्ली काटना:

अलग किए गए नमूनों की मात्रा के आधार पर एसीटेट सेलूलोज़ झिल्ली को विशिष्ट आकार में काटें, आमतौर पर 2.5cmx11cm या 7.8cmx15cm।

नमूना आवेदन पंक्ति को चिह्नित करना:

• झिल्ली के गैर-चमकदार हिस्से पर, एक पेंसिल से नमूना अनुप्रयोग रेखा को हल्के से चिह्नित करें।
• एप्लिकेशन लाइन का स्थान झिल्ली के एक छोर से 2-3 सेमी या कभी-कभी केंद्र रेखा के पास चुना जा सकता है।
• एप्लिकेशन लाइन की स्थिति आमतौर पर प्रारंभिक वैद्युतकणसंचलन प्रयोगों के आधार पर निर्धारित की जाती है।

इलेक्ट्रोड बफर समाधान में विसर्जन:

• एक उथले बर्तन या कल्चर डिश में इलेक्ट्रोड बफर घोल डालें।
• इलेक्ट्रोड बफर समाधान की सतह पर झिल्ली को सावधानी से तैराएं, यह सुनिश्चित करते हुए कि गैर-चमकदार पक्ष नीचे की ओर हो।
• जैसे ही झिल्ली का निचला भाग इलेक्ट्रोड बफर समाधान को अवशोषित करता है, यह धीरे-धीरे पूरी तरह से डूबने तक डूब जाता है।

अतिरिक्त तरल पदार्थ को निकालना और अवशोषित करना:

• झिल्ली के इलेक्ट्रोड बफर समाधान में प्रवेश करने के बाद, इसे सावधानीपूर्वक हटाने के लिए कुंद संदंश का उपयोग करें।
• अत्यधिक सूखापन से बचने के लिए अतिरिक्त इलेक्ट्रोड बफर समाधान को अवशोषित करने के लिए फिल्टर पेपर की दो परतों के बीच झिल्ली को सैंडविच करें।
• यदि झिल्ली पर एक सफेद अपारदर्शी क्षेत्र दिखाई देता है, जो अत्यधिक सूखने का संकेत देता है, तो झिल्ली को इलेक्ट्रोड बफर समाधान में फिर से डुबोएं और फिल्टर पेपर के साथ उचित डिग्री तक अवशोषित करें।

नमूना आवेदन प्रक्रिया

नमूना एप्लिकेशन लाइन का चयन और संचालन:

नमूना को झिल्ली के गैर-चमकदार पक्ष पर नमूना अनुप्रयोग लाइन के साथ लागू करें, आमतौर पर एक बिंदु-जैसे अनुप्रयोग के बजाय एक रैखिक पैटर्न में।

गुणात्मक विश्लेषण नमूना अनुप्रयोग:

• गुणात्मक विश्लेषण नमूना अनुप्रयोग के लिए केशिका ट्यूब (0.5~1.0 मिमी व्यास के साथ) या मोल्ड का उपयोग करें।
• गुणात्मक विश्लेषण के दौरान, नमूने को डुबोएं और नमूना आवेदन लाइन के साथ उस पर "मुहर" लगाएं।

मात्रात्मक विश्लेषण नमूना अनुप्रयोग:

• मात्रात्मक विश्लेषण नमूना अनुप्रयोग के लिए माइक्रोलीटर सिरिंज का उपयोग करें।
• केशिका ट्यूब या माइक्रोलिटर सिरिंज का उपयोग करते समय, इसे नमूना आवेदन लाइन के साथ ऊपर और नीचे या बाएं और दाएं तब तक आसानी से घुमाएं जब तक कि नमूने की पूर्व निर्धारित मात्रा लागू न हो जाए।

नमूना रेखा आयामों को नियंत्रित करना:

• प्रत्येक नमूने को झिल्ली पर लगाने के बाद, नमूना रेखा की लंबाई आम तौर पर 1.5 सेमी होती है, जिसकी चौड़ाई आमतौर पर 4 मिमी से अधिक नहीं होती है।
• नमूना रेखाओं के बीच और नमूना रेखा और झिल्ली के लंबे किनारे के बीच की दूरी आम तौर पर 3 ~ 5 मिमी होती है।

नमूना मात्रा समायोजित करना:

लागू किए गए नमूने की मात्रा या मात्रा नमूना एकाग्रता, धुंधलापन और विश्लेषणात्मक तरीकों जैसे कारकों के आधार पर काफी भिन्न होती है।

मात्रात्मक विश्लेषण के दौरान नमूना मात्रा:

मात्रात्मक विश्लेषण के लिए, नमूना अनुप्रयोग लाइन के प्रत्येक सेंटीमीटर पर लागू नमूना मात्रा आम तौर पर 0.1-0.5μl है, जो 5-1000μg प्रोटीन नमूने की मात्रा के बराबर है।

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सेलूलोज़ एसीटेट मेम्ब्रेन इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा सीरम प्रोटीन को अलग करने का प्रयोग

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