पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) एक आणविक जीव विज्ञान तकनीक है जिसका उपयोग विशिष्ट डीएनए टुकड़ों को बढ़ाने के लिए किया जाता है। इसे जीवित जीव के बाहर डीएनए प्रतिकृति का एक विशेष रूप माना जा सकता है। पीसीआर की मुख्य विशेषता डीएनए की ट्रेस मात्रा को उल्लेखनीय रूप से बढ़ाने की क्षमता है।
पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन चक्र का अवलोकन
बायोनिंजा से छवि
पीसीआर में थर्मल साइक्लिंग प्रक्रिया क्या है?
पीसीआर में तीन बुनियादी चरण होते हैं:
1. टेम्प्लेट डीएनए का विकृतीकरण: टेम्प्लेट डीएनए को एक निश्चित अवधि के लिए लगभग 93°C तक गर्म किया जाता है, जिससे डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए एकल स्ट्रैंड में अलग हो जाता है, जो इसे अगले प्रतिक्रिया चक्र में प्राइमर बाइंडिंग के लिए तैयार करता है।
2. टेम्पलेट डीएनए और प्राइमरों की एनीलिंग: विकृतीकरण के बाद, तापमान लगभग 55 डिग्री सेल्सियस तक कम हो जाता है, जिससे प्राइमरों को एकल-फंसे टेम्पलेट डीएनए पर पूरक अनुक्रमों से जुड़ने की अनुमति मिलती है।
3. प्राइमर का विस्तार: 72 डिग्री सेल्सियस पर, डीएनए टेम्प्लेट-प्राइमर कॉम्प्लेक्स डीएनए पोलीमरेज़ (जैसे टाक डीएनए पोलीमरेज़) की मदद से विस्तार से गुजरता है, टेम्पलेट डीएनए के आधार पर एक नए पूरक स्ट्रैंड को संश्लेषित करने के लिए सब्सट्रेट के रूप में डीएनटीपी का उपयोग करता है।
विकृतीकरण, एनीलिंग और विस्तार प्रक्रियाओं को दोहराने से, अधिक "अर्ध-रूढ़िवादी प्रतिकृति स्ट्रैंड" उत्पन्न होते हैं, जो बाद के चक्रों के लिए टेम्पलेट के रूप में काम कर सकते हैं। प्रत्येक चक्र में लगभग 2 से 4 मिनट लगते हैं, जिससे लक्ष्य जीन को 2 से 3 घंटों के भीतर लाखों गुना बढ़ाया जा सकता है।
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पोस्ट करने का समय: सितम्बर-24-2024