सेमी-ड्राई ट्रांस ब्लॉट उपकरण DYCP-40C के लिए ऑपरेशन चरण

DYCP-40C सेमी-ड्राई ब्लॉटिंग सिस्टम का उपयोग पॉलीएक्रिलामाइड जैल में प्रोटीन को नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली, नायलॉन झिल्ली और पीवीडीएफ झिल्ली जैसी झिल्ली पर स्थानांतरित करने के लिए इलेक्ट्रोफोरेसिस बिजली आपूर्ति के साथ किया जाता है।सेमी-ड्राई ब्लॉटिंग एक क्षैतिज विन्यास में ग्रेफाइट प्लेट इलेक्ट्रोड के साथ किया जाता है, बफर-भिगोए फिल्टर पेपर की शीट के बीच एक जेल और झिल्ली को सैंडविच करता है जो आयन भंडार के रूप में कार्य करता है।इलेक्ट्रोफोरेटिक स्थानांतरण के दौरान, नकारात्मक रूप से चार्ज किए गए अणु जेल से बाहर निकलते हैं और सकारात्मक इलेक्ट्रोड की ओर बढ़ते हैं, जहां वे झिल्ली पर जमा हो जाते हैं।प्लेट इलेक्ट्रोड, केवल जेल और फिल्टर पेपर स्टैक द्वारा अलग किए गए, जेल में उच्च क्षेत्र शक्ति (वी/सेमी) प्रदान करते हैं, जो बहुत ही कुशल, तेजी से स्थानांतरण करते हैं।छोटे DYCP - 40C वैद्युतकणसंचलन सेल की स्थानांतरण सतह 150 × 150 (मिमी) है, जो DYCZ-24DN और DYCZ-24EN वैद्युतकणसंचलन सेल सहित मानक जैल को स्थानांतरित करने के लिए उपयुक्त है।

आइए इस अर्ध-शुष्क ट्रांस ब्लॉट उपकरण के संचालन के बारे में और जानें।

DYCP-40C के संचालन के लिए सामग्री, उपकरण
वैद्युतकणसंचलन बिजली आपूर्ति DYY-6C, अर्ध-शुष्क ट्रांस ब्लॉट उपकरण DYCP-40C, बफर समाधान, और बफर समाधान के लिए कंटेनर।वगैरह।

ऑपरेशन चरण
1. जेल को कांच की प्लेटों के साथ ट्रांसफर बफर घोल में डालें

2. जेल का आकार मापें

3.जेल के आकार के अनुसार फिल्टर पेपर के 3 टुकड़े तैयार करें, और फिल्टर पेपर का आकार जेल के आकार से थोड़ा बड़ा होना चाहिए;यहां हम व्हाटमैन फ़िल्टर पेपर का उपयोग करते हैं;

4.फिल्टर पेपर के 3 टुकड़ों को धीरे-धीरे बफर घोल में डालें, और फिल्टर पेपर को बफर में पूरी तरह से डूबने दें, और हवा के बुलबुले बनने से बचें;

5.जेल और फिल्टर पेपर के आकार के अनुसार नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली तैयार करें और काटें;नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली का आकार जेल और फिल्टर पेपर के आकार से बड़ा होना चाहिए;

6.नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली को बफर समाधान में डालें;

7.फिल्टर पेपर के 3 टुकड़े निकालें और अतिरिक्त बफर घोल को तब तक हटा दें जब तक कि झिल्ली से कोई बफर घोल न गिर जाए;और फिर फ़िल्टर पेपर को DYCP-40C के तल पर रखें;

8.कांच की प्लेटों से जेल लें, स्टैकिंग जेल को धीरे से साफ करें, और जेल को बफर समाधान में डालें;

9.जेल को फिल्टर पेपर पर रखें, हवा के बुलबुले से बचने के लिए जेल के एक सिरे से शुरू करें;

10.जेल और फिल्टर पेपर के बीच हवा के बुलबुले को दूर करने के लिए एक उचित उपकरण का उपयोग करें।

11।जेल पर नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली को, जेल की ओर खुरदुरे भाग को ढक दें।और फिर झिल्ली और जेल के बीच हवा के बुलबुले को दूर करने के लिए एक उचित उपकरण का उपयोग करें।झिल्ली पर फिल्टर पेपर के 3 टुकड़े रखें।फ़िल्टर पेपर और झिल्ली के बीच हवा के बुलबुले को दूर करने के लिए अभी भी एक उचित उपकरण का उपयोग करने की आवश्यकता है।

12.ढक्कन को ढकें, और इलेक्ट्रोफोरेसिस चलाने वाले पैरामीटर सेट करें, निरंतर वर्तमान 80mA;

13.वैद्युतकणसंचलन किया जाता है.हमें निम्नलिखित के रूप में परिणाम मिलता है;

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