वैद्युतकणसंचलन के लिए अगारोज जेल तैयार करने के लिए चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका

क्या आपको अगारोज जेल तैयार करने में कोई कठिनाई आती है?चलिए साथ फॉलो करते हैंजेल तैयार करने में हमारे प्रयोगशाला तकनीशियन.

एगरोज़ जेल की तैयारी प्रक्रिया में निम्नलिखित चरण शामिल हैं:

एगरोज़ पाउडर का वजन

अपने प्रयोग के लिए वांछित सांद्रता के अनुसार अगारोज पाउडर की आवश्यक मात्रा का वजन करें। सामान्य एगरोज़ सांद्रता 0.5% से 3% तक होती है। उच्च सांद्रता का उपयोग छोटे डीएनए अणुओं को अलग करने के लिए किया जाता है, जबकि कम सांद्रता का उपयोग बड़े अणुओं के लिए किया जाता है।

बफर समाधान तैयार करना

एगरोज़ पाउडर को एक उपयुक्त इलेक्ट्रोफोरेसिस बफर, जैसे 1× टीएई या 1× टीबीई में जोड़ें। बफ़र की मात्रा आपके प्रयोग के लिए आवश्यक जेल की मात्रा से मेल खानी चाहिए।

एगरोज़ को घोलना

एगरोज़ और बफर मिश्रण को तब तक गर्म करें जब तक कि एगरोज़ पूरी तरह से घुल न जाए। यह माइक्रोवेव या हॉट प्लेट का उपयोग करके किया जा सकता है। घोल को उबलने से बचाने के लिए बीच-बीच में हिलाते रहें। एगरोज़ घोल बिना किसी दृश्य कण के स्पष्ट होना चाहिए।

एगरोज़ घोल को ठंडा करना

गर्म एगरोज़ घोल को लगभग 50-60°C तक ठंडा होने दें। समय से पहले जमने से रोकने के लिए शीतलन प्रक्रिया के दौरान घोल को हिलाएँ।

न्यूक्लिक एसिड दाग जोड़ना (वैकल्पिक)

यदि आप जेल में डीएनए या आरएनए की कल्पना करना चाहते हैं, तो आप इस स्तर पर जेलरेड या एथिडियम ब्रोमाइड जैसे न्यूक्लिक एसिड दाग जोड़ सकते हैं। इन दागों को संभालते समय दस्ताने पहनें और सावधानी बरतें, क्योंकि ये जहरीले हो सकते हैं।

जेल कास्टिंग

ठंडा एगरोज़ घोल को तैयार इलेक्ट्रोफोरेसिस जेल मोल्ड में डालें। नमूना कुँए बनाने के लिए एक कंघी डालें, यह सुनिश्चित करें कि कंघी सुरक्षित है और घोल सांचे में समान रूप से वितरित है।

 जेल जमना

जेल को कमरे के तापमान पर जमने दें, जिसमें आमतौर पर जेल की सांद्रता और मोटाई के आधार पर 20-30 मिनट लगते हैं।

Rकंघी को हटाना

एक बार जब जेल पूरी तरह से जम जाए, तो नमूना छिद्रों को प्रकट करने के लिए कंघी को सावधानीपूर्वक हटा दें। जेल को सांचे के साथ वैद्युतकणसंचलन कक्ष में रखें और इसे उचित मात्रा में वैद्युतकणसंचलन बफर के साथ कवर करें, यह सुनिश्चित करते हुए कि जेल पूरी तरह से डूबा हुआ है।

वैद्युतकणसंचलन की तैयारी

जेल तैयार होने के बाद, अपने नमूने कुओं में लोड करें, और इलेक्ट्रोफोरेसिस प्रयोग के साथ आगे बढ़ें.

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