प्री-कास्ट जेल प्रोटीन इलेक्ट्रोफोरेसिस प्रयोग के लिए प्रोटोकॉल

प्रायोगिक तैयारी

उपकरण की जाँच करें: सुनिश्चित करें कि प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन कक्ष, बिजली आपूर्ति और स्थानांतरण प्रणाली कार्य क्रम में हैं।हम प्रस्ताव रखते हैंDYCZ-24DN प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन के लिए,डीवाईसीजेड-40डी स्थानांतरण प्रणाली के लिए, औरDYY-6C बिजली आपूर्ति के लिए.

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नमूना तैयार करना: प्रायोगिक डिज़ाइन के अनुसार अपने नमूने तैयार करें। यदि आवश्यक हो तो प्रोटीन के नमूनों को कम करने वाले एजेंटों और प्रोटीज़ से उपचारित करें।

इलेक्ट्रोफोरेसिस बफर तैयार करें: उचित सांद्रता पर इलेक्ट्रोफोरेसिस बफर तैयार करने के लिए प्री-कास्ट जेल के साथ दिए गए निर्देशों का पालन करें।

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प्री-कास्ट जेल को संभालना:

प्री-कास्ट जेल निकालें: पैकेजिंग को सावधानीपूर्वक खोलें और प्री-कास्ट जेल को उसके कंटेनर से हटा दें, ध्यान रखें कि जेल मैट्रिक्स को नुकसान न पहुंचे।

नमूना लोड हो रहा है: अपने तैयार नमूनों को माइक्रोपिपेट या अन्य उपयुक्त उपकरणों का उपयोग करके जेल के नमूना कुओं में लोड करें। प्रत्येक नमूने के लोडिंग क्रम और मात्रा पर ध्यान दें।

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वैद्युतकणसंचलन शर्तें सेट करें: वर्तमान तीव्रता, वोल्टेज और अवधि सहित वैद्युतकणसंचलन शर्तें निर्धारित करें। सुनिश्चित करें कि आप इष्टतम पृथक्करण के लिए उपयुक्त स्थितियाँ चुनें।

वैद्युतकणसंचलन चलाना

वैद्युतकणसंचलन आरंभ करें: जेल को वैद्युतकणसंचलन कक्ष में रखें, बिजली की आपूर्ति कनेक्ट करें, और वैद्युतकणसंचलन शुरू करें। स्थिर धारा सुनिश्चित करने के लिए प्रक्रिया की निगरानी करें।

पूर्ण वैद्युतकणसंचलन: जब नमूने वांछित स्थिति में चले जाएं तो वैद्युतकणसंचलन बंद कर दें। नमूनों को जेल से बाहर निकलने से रोकने के लिए इलेक्ट्रोफोरेसिस को बहुत लंबे समय तक चलाने से बचें।

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प्रोटीन स्थानांतरण

स्थानांतरण प्रणाली तैयार करें: जेल प्लेट को चैम्बर से बाहर निकालें और प्रोटीन स्थानांतरण के लिए तैयार करें। इसमें झिल्ली को काटना और ट्रांसफर बफर तैयार करना शामिल हो सकता है।

ट्रांसफर सेटअप को इकट्ठा करें: ट्रांसफर सिस्टम के साथ दिए गए निर्देशों के अनुसार प्रोटीन ट्रांसफर सेटअप को इकट्ठा करें। संयोजन क्रम और सेटिंग शर्तों पर ध्यान दें।

प्रोटीन स्थानांतरण चलाएँ: प्रोटीन स्थानांतरण प्रक्रिया शुरू करें और इसकी प्रगति की निगरानी करें। सुनिश्चित करें कि स्थानांतरण समय और शर्तें आपके प्रयोग की आवश्यकताओं को पूरा करती हैं।

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स्थानांतरण के बाद की प्रक्रिया:

झिल्ली प्रबंधन: स्थानांतरित झिल्ली को आवश्यकतानुसार संसाधित करें, जिसमें प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के आधार पर धुंधलापन, इम्युनोब्लॉटिंग, या अन्य पोस्ट-ट्रांसफर प्रक्रियाएं शामिल हो सकती हैं।

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परिणाम विश्लेषण: अपने प्रयोगात्मक डिज़ाइन और प्रसंस्करण चरणों के आधार पर परिणामों का विश्लेषण करें। निष्कर्षों की व्याख्या करें और प्रासंगिक चार्ट या ग्राफ़ तैयार करें।

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पोस्ट करने का समय: दिसंबर-15-2023