धूमकेतु परख (एकल कोशिका जेल वैद्युतकणसंचलन, एससीजीई) एक संवेदनशील और तीव्र तकनीक है जिसका उपयोग मुख्य रूप से व्यक्तिगत कोशिकाओं में डीएनए क्षति का पता लगाने और मरम्मत के लिए किया जाता है। "धूमकेतु परख" नाम उस विशिष्ट धूमकेतु-जैसी आकृति से आया है जो परिणामों में दिखाई देती है: कोशिका का केंद्रक "सिर" बनाता है, जबकि क्षतिग्रस्त डीएनए टुकड़े स्थानांतरित होकर धूमकेतु जैसी एक "पूंछ" बनाते हैं।
सिद्धांत
धूमकेतु परख का सिद्धांत विद्युत क्षेत्र में डीएनए अंशों के प्रवास पर आधारित है। अक्षुण्ण डीएनए कोशिका केंद्रक के भीतर रहता है, जबकि क्षतिग्रस्त या खंडित डीएनए एनोड की ओर पलायन करता है, जिससे धूमकेतु की "पूंछ" बनती है। पूंछ की लंबाई और तीव्रता डीएनए क्षति की सीमा के सीधे आनुपातिक है।
प्रक्रिया
- सेल तैयारी: परीक्षण की जाने वाली कोशिकाओं को कम पिघलने-बिंदु एगेरोज़ के साथ मिश्रित किया जाता है और एक समान परत बनाने के लिए माइक्रोस्कोप स्लाइड पर फैलाया जाता है।
- कोशिका अपघटन: डीएनए को उजागर करते हुए कोशिका झिल्ली और परमाणु झिल्ली को हटाने के लिए स्लाइडों को एक लसीका समाधान में डुबोया जाता है।
- वैद्युतकणसंचलन: स्लाइडों को क्षारीय या तटस्थ परिस्थितियों में एक वैद्युतकणसंचलन कक्ष में रखा जाता है। क्षतिग्रस्त डीएनए टुकड़े विद्युत क्षेत्र के प्रभाव में सकारात्मक इलेक्ट्रोड की ओर चले जाते हैं।
- धुंधलापन: वैद्युतकणसंचलन के बाद, डीएनए को देखने के लिए स्लाइडों को फ्लोरोसेंट डाई (उदाहरण के लिए, एथिडियम ब्रोमाइड) से रंग दिया जाता है।
- सूक्ष्म विश्लेषण: प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप या विशेष सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके, धूमकेतु आकृतियों का विश्लेषण किया जाता है, और पूंछ की लंबाई और तीव्रता जैसे मापदंडों को मापा जाता है।
बायोरेंडर से छवि
डेटा विश्लेषण
धूमकेतु परख के परिणामों का मूल्यांकन कई प्रमुख मापदंडों के आधार पर किया जाता है:
- पूंछ की लंबाई: डीएनए के प्रवास की दूरी को दर्शाता है, जो डीएनए क्षति की सीमा को दर्शाता है।
- पूंछ डीएनए सामग्री: डीएनए का प्रतिशत जो पूंछ में स्थानांतरित होता है, अक्सर डीएनए क्षति के मात्रात्मक माप के रूप में उपयोग किया जाता है।
- ऑलिव टेल मोमेंट (ओटीएम): डीएनए क्षति का अधिक व्यापक माप प्रदान करने के लिए पूंछ की लंबाई और पूंछ डीएनए सामग्री दोनों को संयोजित करता है।
अनुप्रयोग
- जीनोटॉक्सिसिटी अध्ययन: कोशिका डीएनए पर रसायनों, दवाओं और विकिरण के प्रभावों का आकलन करने के लिए धूमकेतु परख का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जो इसे जीनोटॉक्सिसिटी परीक्षण के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण बनाता है।
- पर्यावरण विष विज्ञान: यह जीवों के डीएनए पर पर्यावरण प्रदूषकों के प्रभाव का विश्लेषण करने में मदद करता है, पारिस्थितिकी तंत्र सुरक्षा में अंतर्दृष्टि प्रदान करता है।
- चिकित्सा एवं नैदानिक अनुसंधान: धूमकेतु परख का उपयोग डीएनए मरम्मत तंत्र, कैंसर और अन्य डीएनए से संबंधित बीमारियों के अध्ययन में किया जाता है। यह डीएनए पर रेडियोथेरेपी और कीमोथेरेपी जैसे कैंसर उपचारों के प्रभाव का भी मूल्यांकन करता है।
- खाद्य एवं कृषि विज्ञान: कीटनाशकों, खाद्य योजकों और अन्य पदार्थों की सुरक्षा का आकलन करने और पशु मॉडल में उनके विषाक्त प्रभावों का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता है।
लाभ
- उच्च संवेदनशीलता: डीएनए क्षति के निम्न स्तर का पता लगाने में सक्षम।
- सरल ऑपरेशन: तकनीक सीधी है, जो इसे उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग के लिए उपयुक्त बनाती है।
- व्यापक अनुप्रयोग: इसे पशु और पौधों की कोशिकाओं सहित विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं पर लागू किया जा सकता है।
- परिमाणीकरण चुनौतियाँ: डीएनए क्षति पर गुणात्मक डेटा प्रदान करते समय, मात्रात्मक विश्लेषण सॉफ्टवेयर और छवि विश्लेषण तकनीकों पर बहुत अधिक निर्भर करता है।
- प्रायोगिक स्थितियाँ: परिणाम वैद्युतकणसंचलन समय और पीएच जैसे कारकों से प्रभावित हो सकते हैं, जिसके लिए प्रयोगात्मक स्थितियों के सावधानीपूर्वक नियंत्रण की आवश्यकता होती है।
सीमाएँ
धूमकेतु परख अपने लचीलेपन और डीएनए क्षति का पता लगाने और मरम्मत में उच्च संवेदनशीलता के कारण जैव चिकित्सा अनुसंधान, पर्यावरण विज्ञान और दवा विकास में एक अमूल्य उपकरण है। बीजिंग लियूई बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड (लियूई बायोटेक्नोलॉजी)धूमकेतु परख के लिए क्षैतिज वैद्युतकणसंचलन कक्ष प्रदान करता है। के बारे में चर्चा करने के लिए हमसे संपर्क करने के लिए आपका स्वागत हैधूमकेतु परखशिष्टाचार।
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पोस्ट करने का समय: सितम्बर-20-2024